Ni-Sepharose FF/镍-琼脂糖凝胶(HIS 融合蛋白亲和纯化填料)
金属螯合亲和色谱,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的一些氨基酸,如组氨酸能与多种过渡金属离子Cu2+,Zn2+,Ni2+,Co2+,Fe3+发
生特殊的相互作用,利用这个原理可以把富含这类氨基酸的蛋白质吸附,从而达到分离的目的。由于这个原因,偶联这些金属离子的琼脂糖凝胶就能够选择性地分
离出这些含有多个组氨酸的蛋白以及对金属离子有吸附作用的多肽、蛋白和核苷酸。半胱氨酸和色氨酸也能与固定金属离子结合,但这种结合力要远小于组氨酸残基与力。将目标蛋白与6xhis 融合表达,然后利用固定化的镍进行纯化,是比较经典的纯化路线。简单,快捷,纯度高。
Ni-SepharoseFF 结合载量:30-50mg /ml。
Ni-SepharoseFF规格:5ml, 10ml, 100ml
实验电泳图像:
1、标准蛋白分子量marker(由大到小90/66/45/27/14.4kDa)
2、全菌液裂解
3、过柱收集液
4,5,6 分别为1.2.3 倍柱体积咪唑洗脱收集液