EK-500-120-ECP 兔抗大肠杆菌蛋抗体ELISA试剂盒Rabbit Anti-E. coli proteins Ig's ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

检测流程

样本预处理：不需要

使用前将所有试剂恢复到室温状态，准备校准液、参照样本和待测样本，一式几份。一旦开始，直到测试完中间不能中断。

1. 配制皮质醇-HRP 结合物溶液和洗涤液。

2. 取出所需数量的微孔条。将不用的微孔条重新封装好放回冰箱。

3. 将各种校准液，参照样品和受测样品各吸取20μl 到相应的已做好标记的孔里面。

4. 吸取100μl 的结合物工作液到添加到每个孔（推荐使用多通道吸管）。

5. 室温下在板振动筛（大约200 转/分钟）下孵育45 分钟。

6. 用300μl 稀释的洗涤液冲洗所有的孔三次，用吸水纸吸干板上所有水分，并确保其被吸干。建议使用清洗器。

7. 吸取150μl 的TMB 底物溶液滴入到所有的孔中，并在中间间隔一段固定时间。

8. 室温下在板振动筛孵育15-20 分钟或者直到校准液A 呈现深蓝色，得到理想OD值。

9. 吸取50μl 的终止液滴到所有孔，间隔时间与第7 步相同。

10. 加入终止液20 分钟后，用微孔板读数器读取在450nm 滤光片下板孔的OD值。